肽N-糖苷酶F—83534-39-8

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中文：肽N-糖苷酶F (快速版)

英文：PNGase F（Fast）

CAS：83534-39-8

分子式：EC 3.5.1.52

纯度：≥95%

中文同义词：N-糖酰胺酶,肽N-糖苷酶,N-糖苷酶 F

英文同义词：PNGase F from Elizabethkingia miricola,Rapid peptide N- glycosides F

产品描述

PNGase F 是从糖蛋白中去除几乎所有N-糖链的最有效的方法。PNGase F 是一种酰胺酶，切割糖蛋白上的N-连接糖链。切割的糖型有：高甘露糖、杂合和复杂寡糖；切割位点为：最内侧的N-乙酰葡糖胺和天冬酰胺之间的糖苷键。

技术指标

外观:无色液体;蛋白纯度: ≥95%（SDS-PAGE）;比活性: ≥500,000 U/mL

酶学性质

来源:微生物;分类: EC 3.5.1.52;分子量; 35 kDa(SDS-PAGE); 等电点:8.14; 最适pH:7.0-8.0;最适温度: 65℃; 底物选择性水解蛋白质的 Asn  相连的 N- 糖链，使N-聚糖保持完整。糖蛋白水解位点除含 α1-3岩藻糖苷键外，能切割所有N-糖链。激活剂: DTT; 抑制剂:SDS; 储存温度: -25～-15°C; 失活条件:含1μL PNGase F 的 20μL 反应混合物在 75°C 孵育1 0min 即可失活。

用途:用于从糖蛋白中去除 N- 糖链。

酶活定义: 单位酶活定义为在下述条件下，10μL 的反应体系中，37°C 反应 1 小时从 10μg 变性 RNase B 中除去超过 95% 的碳水化合物所需要的酶量。

操作步骤

1．用去离子水溶解 1-20μg 的糖蛋白，加入 1μL 的 10×Glycoprotein DenaturingBuffer，用去离子水定容到 10μL；

2．100°C 孵育 10 min；

3．加入2μL 的 10×GlycoBuffer 2，2μL 的 10% NP -40，轻轻吹打混匀；

4．加入 1-2μL 的 PNGase F，加去离子水到 20μL，轻轻吹打混匀；

5．37°C 孵育 60 min；

6．用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。